SimpleStep ELISA®キット
洗浄ステップはたった1回、性能に妥協しない90分で完了する高感度なELISA
SimpleStep ELISA®とは？
- 洗浄1回、簡単なプロトコールでアッセイ時間を90分以下に短縮
- 優れた抗体による高い感度、特異性、そして再現性
- 生体サンプルですべて検証済み
- 96ウェルプレート形式、12 x 8 ウェルに分離可能
- 10個入りパックおよび384ウェルフォーマットが利用可能
SimpleStep ELISA®キットは、可能な限り操作をシンプルに、かつ有効性を高めたサンドイッチELISAです。 従来のサンドイッチELISAではアッセイに3時間以上かかりますが、SimpleStep ELISA®キットでは洗浄ステップが1回のみ、わずか90分で結果が得られます。優れた特異性をもつリコンビナント抗体を使用しているため、性能が損なわれることはありません。
SimpleStep ELISAの仕組み
- 図1. SimpleStep ELISAキットでは、ターゲット捕捉用抗体と検出用抗体の「サンドイッチ」が溶液中に形成され、このサンドイッチペアは捕捉用抗体に結合した親和性タグを介してウェルに結合します。
従来のサンドイッチELISAでは、ターゲット・タンパク質の少なくとも2つの異なる部位に結合する抗体ペアを使用します。 捕捉抗体はマイクロプレートのウェルにあらかじめコーティングされ、ターゲット・タンパク質に選択的に結合します。 洗浄後、検出抗体を添加します。検出抗体はターゲット・タンパク質の別の（2つ目の）部位に結合し、サンドイッチ複合体を形成します。
SimpleStep ELISAキットでは、このプロセスにCaptSure™システム（洗浄1回で抗体-ターゲットのサンドイッチ複合体を形成させるセミホモジニアスなシステム）を使用しています。 わずか1回のインキュベーションと洗浄ステップで、完全なサンドイッチ複合体をウェル内に形成し、免疫親和性タグによりプレートに固相化します（図1）。
ELISAのアップグレード
SimpleStep ELISA®の特長 | 利点 |
|---|---|
リコンビナント抗体による高い感度、再現性、特異性 | 最初の実験から一貫して信頼できる結果 |
生体サンプルで検証済み | 内在性タンパク質との確かな反応 |
洗浄1回、迅速（90分）で標準化されたプロトコール | SimpleStep ELISA®の全キットにわたり迅速かつ簡易なプロトコールのため、エラーのリスクを低減。 |
96ウェルプレート形式、12 x 8ウェルに分離可能 | 残った試薬は使い回せるため、無駄がない。 1つのキットで小規模の複数の実験が可能 |
10パックサイズが利用可能 | 同一ロットでの提供を保証 |
競合SimpleStep ELISA®
競合SimpleStep ELISA®キットは、サンドイッチSimpleStep ELISAキットと同様のスピードとシンプルさを兼ね備えたキットです。プロトコールのステップ数が少なく、アッセイ時間は90分です。
サンドイッチELISA®では1つのエピトープしか認識できませんが、競合SimpleStep ELISA®キットを使用することで、サンドイッチELISA®では測定できない低分子やホルモンを検出することができます。
アブカムの競合SimpleStep ELISA®キットではアフィニティタグを使用しており、このタグをSimpleStep ELISA®プレートに固相化されたモノクローナル抗体が認識します。 この競合ELISA®では、抗原抗体複合体をワンステップで形成できるため、アッセイ時間を大幅に短縮することができます。
抗原ダウンフォーマットでは、標識抗原とサンプル中の非標識抗原が競合してHRP標識済み捕捉抗体に結合します。 抗体ダウンフォーマットでは、HRP標識済み抗原とサンプル中の非標識抗原が競合して捕捉抗体に結合します。 CaptSure™アフィニティタグ付きの抗原または抗体は、SimpleStep ELISA®プレートに結合します。 標識済み抗原のみを添加したウェルと比べてシグナルが減少した場合、サンプル中に抗原が存在することを示します。
SimpleStep ELISA®キットにリコンビナント抗体を使用する理由
ELISAでは抗体を用いてターゲット抗原を検出するため、使用する抗体の特異性は高くなければなりません。
リコンビナント・モノクローナル抗体は、高収量発現ベクターを用いてin vitro でので作製されており、以下の利点があります。
- 高い一貫性と再現性
- 高い感度と検証済みの特異性
- 容易なスケールアップと供給保証
SimpleStep ELISAでは、可能な限りリコンビナント・モノクローナル抗体を使用しています。つまり、最初の実験から信頼できる、再現性のある結果が得られます。
これらのマッチド抗体ペアは、血漿や血清などの生理学的に重要なサンプルでの使用に最適化されています。 また、キャリアフリーやそのまま標識可能な製品も利用できるほか、個別の捕捉抗体や検出抗体としても使用できます。このため、ワークフロー全体を通して柔軟性と一貫性を確保できます。
妥協のない感度
SimpleStep ELISAキットは、性能を損なうことなくアッセイ時間を大幅に短縮します。 75種類の一般的なヒトおよびマウスのタンパク質について、SimpleStep ELISAキットと他社のELISAキットの感度を比較しました。 SimpleStep ELISAは、75種類中56種類で優れた感度を示しました（図2）。
国際標準でキャリブレーション済み
分泌血清や血漿ベースのターゲットはすべてテストされ、WHO（世界保健機関）の参考基準値範囲内に入ります。 また、可能な限りNIBSC（国立生物学的製剤研究所）の国際標準品をSimpleStep ELISAキットでキャリブレーションし、データの比較のための換算係数を公表しています。
国際標準でキャリブレーションすることにより、異なるキットで得られたデータセットでも比較することができます。 さらに、すべてのSimpleStep ELISA®キットは、複数の生体サンプルを用いてアッセイの特異性を検証済みです。
SimpleStep ELISAキットのNIBSC換算係数の例
ハイスループットスクリーニング（HTS）とSimpleStep ELISA
アブカムのHTSツールと試薬は、スクリーニングを実施するたびに再現性と信頼性が高い結果が素早く得られるよう特別に開発されています。 当社のSimpleStep ELISA® キットはすべて、384ウェルSimpleStep ELISA®マイクロプレートを使用して384ウェルプレートフォーマットに適合させることができます。 これらのコーティング済みプレートは自動分注機用に設計され、多くの標準的なプレートリーダーで使用できるなど柔軟性があるため、研究のスケールアップに役立ちます。
4倍高速のイムノアッセイ
384ウェルの当社のSimpleStep ELISA® キットを使用することで、同じ90分間で従来のELISA法よりも4倍のサンプル数を処理できます。
90分で測定できる384ウェルSimpleStep ELISA® キットの販売を開始し、ラインナップ拡大中です。 384ウェルSimpleStep ELISA®マイクロプレートと384ウェルSimpleStep ELISA®キットは、標準キットと同様の迅速でシンプルな洗浄1回のプロトコールを使用しています。ただし、必要なサンプル量は少なく、96ウェルキットで必要な量のわずか4分の1です。
当社のSimpleStep ELISA®キットのうち280以上は、384ウェルフォーマットにおいて検証済みです。 最も人気のある384ウェルキットを以下からご覧ください：
Ab ID | 製品名 |
|---|---|
Human Pro-Collagen I alpha 1 ELISA Kit | |
Human Albumin ELISA Kit | |
Human AST ELISA Kit (Aspartate Aminotransferase) | |
Human ALT ELISA Kit | |
GFP ELISA Kit | |
Human IgG ELISA Kit | |
Human Albumin ELISA Kit | |
Human TREM2 ELISA Kit | |
Human Fibrinogen ELISA Kit - high sensitivity | |
Human IL-6 ELISA Kit | |
Mouse ALT ELISA Kit | |
Exendin-4 ELISA Kit | |
Human IgA ELISA Kit | |
Mouse AST ELISA Kit (Aspartate Aminotransferase) |
分析対象
現在ほぼ700種類のターゲットに対するSimpleStep ELISA® キットを販売しています、これには、PD-L1、GFP、フィブリノゲンといった一般的なタンパク質が含まれ、ラインナップ拡大中です。
最も一般的なELISAターゲットトップ10に対応するSimpleStep ELISA®キット：
* ウサギ、ハムスター、イヌ、モルモットのサンプルも利用可能
** アカゲザルとも反応
*** 複数の種に対応