ヒストンメチル化アッセイ

ヒストンメチルトランスフェラーゼ（HMT）のアッセイの開発は、 kが低く（ターンオーバーは通常1 min キャット^-1未満）、 メチル供与体であるS-アデノシルメチオニン（SAM）のK M値が低いため、 簡単ではありません。 したがって、HMTアッセイの感度は非常に高くなければなりません。 多くのHMT活性アッセイでは、メチル化反応の副産物であるS-アデノシルホモシステイン（SAH）の量を測定します。 これは、アッセイがHMTに特異的ではなく、精製されたタンパク質やタンパク質複合体しか使用できないことを意味します。 また、ドナーとして 3H-SAMを使用することが多いため、放射性物質を取り扱うこともあります。

当社のHMT活性アッセイは、抗体を使用してメチル化産物を検出することでこれらの問題を克服し、以下を提供します。    

• 放射性物質を必要としない、簡単な定量的検出
• 精製タンパク質だけでなく核抽出物を使用できる（アッセイは目的の修飾に特異的であるため）
• マイクロプレートフォーマットで、読み取りはシンプルな比色法または蛍光分析     
• 3時間以内にデータが得られる

ヒストン脱メチル化酵素活性アッセイ

ヒストン脱メチル化酵素アッセイでは通常、脱メチル化の副産物であるホルムアルデヒドの生成を測定します。 したがって、これらのアッセイは界面活性剤、チオール基および各種イオンによる影響を受けやすいという性質があります。 これらのアッセイは脱メチル化酵素に特異的ではなく、精製されたタンパク質しか使用できません。

• アブカムのヒストン脱メチル化酵素アッセイは、脱メチル化産物の生成を直接測定することによってこれらの問題を回避しており、次のような特徴があります。
• ホルムアルデヒドを用いたアッセイよりも感度が高い（20–1000倍）
• チオール、界面活性剤またはイオンによる影響を受けずに、より正確なデータが得られます
• 精製タンパク質だけでなく核抽出物を使用できます（アッセイは目的の修飾に特異的であるため）
• マイクロプレートフォーマットで、読み取りはシンプルな比色法または蛍光分析     
• アッセイ時間は3時間

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サンプル中のヒストンまたはヒストン修飾 の総量を測定する必要がある場合は、当社の定量キットをお試しください。全製品リストはこちら。