Anti-PCNA 抗体 [5E6/2] (ab70472)

Gracias por tu respuesta.
No hay ningún problema en reemplazaros el anticuerpo por otro diferente, nuestra garantía Abpromise contempla esta posibilidad.
Acabo de realizar el pedido, completamente gratuito del anticuerpo ab104232 como solicitas. Recibiréis una confirmación automática del mismo con más detalles.
Si necesitáis cualquier información referente al pedido, no dudéis en contactarnos, referenciando el número de éste: XXXXX.
Te recuerdo que la garantía Abpromise cubre también a los reemplazos gratuitos, así que si tuvierais cualquier otro problema, o requirierais mas información / asistencia, por favor, no dudéis en volvernos a contactar.

Muchas gracias por mandarnos más detalles del protocolo.
Lamento mucho los inconvenientes causados, y tal y como especifica nuestra garantía Abpromise, os enviaré un reemplazo, reembolso, o vale sin caducidad en compensación.
He comprobado que actualmente no tenemos ningún lote diferente al último recibido en stock. Si lo preferís podemos enviaros un anticuerpo contra una proteína deferente, u otro diferente también contra PCNA. Las alternativas validadas en WB se encuentran en el siguiente enlace:
https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=searchresults&search=PCNA&pt=1&sk=app&sv=69&sn=WB&l=2&fViewMore=1
Quedo pues a la espera de que me confirméis cómo podemos ayudaros a resolver este incidente.
Muchas gracias por vuestra colaboración.

Muchas gracias por reenviar el cuestionario.
Para tratar de obtener una señal más intensa os recomiendo llevar a cabo un lisado de la fracción nuclear en lugar de toda la célula. Para ello, podéis usar un buffer como RIPA, adecuado para este propósito u otro protocolo de fraccionamiento nuclear.
Es posible que el tag HA esté enmascarando el epítopo y el anticuerpo no tenga acceso al mismo. ¿Es posible realizar el western usando el wild type sin tag?
En cuanto a la cantidad de muestra cargada por calle, ¿se han cargado 30mg o 30ug? No recomendamos cargar más de 40ug, para no saturar la membrana.
Otra prueba que podéis intentar para optimizar el resultado es diluir los anticuerpos en TBST sin BSA, para no añadir más bloqueo durante la incubación.
Y simplemente por comprobar que los reactivos usados están en perfecto estado, es aconsejable verificar que el sustrato enzimático no se ha degradado y da la señal esperada.
Os propongo que probéis estas variaciones en el protocolo y en caso de seguir sin obtener el resultado esperado me volváis a contactar. Si el anticuerpo resultara haber salido defectuoso, al estar en garantía, os mandaríamos un vial nuevo gratuito o un reembolso en compensación.
Así pues, os deseo mucha suerte, y espero vuestra respuesta.