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抗体標識キット

45種類以上の多様な標識に最適化された、迅速で使いやすい標識キットで、抗体とタンパク質を強力な検出ツールに変えましょう。 アブカムの標識キットは、123種類からなる製品ラインナップがあり、700件の論文で引用実績があります。複雑な精製手順は必要ありません。わずか30秒の簡潔なハンズオンタイムで標識でき、高い収率で標識した抗体を作成することができます。

目次

  1. 用途に適した標識キットを選択
  2. 抗体標識 とは何ですか?また、どのように作用しますか?
  3. 抗体標識における蛍光色素の選択
  4. 迅速かつ使いやすい標識キットを45種類以上ご用意しております
  5. 標識度とF:P比
  6. Lightning-Link™抗体標識技術の利点は何ですか?
  7. ダウンストリームアプリケーションをサポート
  8. よくある質問(FAQ)

用途に適した標識キットを選択

適切な 標識 キットの選択は、アッセイタイプ、検出方法、およびラベルの選択によって異なります。 以下のガイドは、アプリケーションと最適な 標識 戦略を一致させるのに役立ちます。

検証済みアプリケーション

推奨ラベルタイプ

適切な 標識 キット

免疫組織化学染色(IHC)

HRP、AP、蛍光色素

酵素 標識 キット、蛍光キット

フローサイトメトリー

蛍光色素、タンデム色素

蛍光およびタンデム色素キット

ラテラルフローアッセイ(LFA)

金ナノ粒子、ラテックス、 ユウロピウム

ゴールドナノ粒子キット、ビオチン/ストレプトアビジンゴールドキット、ラテックス、ユーロピウムキット

ELISA

ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ、 アルカリホスファターゼ、ビオチン

酵素およびビオチン化キット

マルチプレックスイメージング

Alexa Fluor®、 DyLight®、Cy、ATTO、タンデム色素

蛍光およびタンデム色素キット

この選択ガイドは、実験ニーズを適切な 標識 アプローチに合わせることで、意思決定を合理化するのに役立ちます。

4時間以内に標識でき、操作時間はわずか30秒

金ナノ粒子標識キット

1時間以内に標識でき、操作時間は5分間

金属標識キット

2時間以内に金属同位体標識ができ、操作時間は30秒

  • 精製ステップのない迅速な抗体標識
  • 蛍光、酵素、または金属同位体の標識
  • マルチプレックスアッセイの開発

仕組み:

  1. 凍結乾燥ラベルに直接抗体を追加
  2. インキュベーション(Fast LLレンジでは約3 時間15 分)
  3. 精製 不要

互換性:

金ナノ粒子 標識 キットを使用するタイミング:

  • ラテラルフローアッセイの開発
  • 迅速診断検査
  • カラーメトリック検出ワークフロー

仕組み:

  1. 金ナノ粒子に対する結合抗体
  2. インストゥルメンテーションなしで可視信号を生成

互換性:

  • LFAに最適
  • 様々な抗体タイプおよびタンパク質に対応

メタル 標識 キットを使用するタイミング:

  • マスサイトメトリー(CyTOF)

仕組み:

  1. 金属同位体に対する結合抗体
  2. 金属質量の重複なしでマルチプレックス検出を有効にする

互換性:

  • 金属ベースの検出プラットフォーム向けに設計
  • 高度なサイトメトリーワークフローに最適

抗体標識 とは何ですか?また、どのように作用しますか?

抗体標識とは、抗体に特定のタグを化学的に結合させることです。 標識済み一次抗体を使用した場合、目的のターゲット抗原を直接検出できるため、二次抗体は必要ありません。

標識には蛍光色素、酵素、タンパク質などを使用でき、標識の選択や組み合わせは、実験で使用するアプリケーション(マルチプレックスIHC、フローサイトメトリー、LFAなど)やマルチプレックスパネルによって異なります。 

直接標識した一次抗体を使用することで、時間を大幅に節約し、実験プロトコールを簡素化することができます。

抗体標識における蛍光色素の選択

蛍光色素は、特にフローサイトメトリー、 免疫蛍光染色、マルチプレックスイメージングなどの 蛍光ベースのアプリケーションにおいて、 抗体標識で最も広く使用されている標識の1つです。

蛍光色素を選択する際、考慮すべき主な要因は次のとおりです。

  • 励起および 放出 スペクトル(機器の互換性)
  • 明るさと光安定性
  • マルチプレックスパネルのスペクトルオーバーラップ
  • アッセイとの互換性

一般的な 蛍光色素 オプションには、以下が含まれます。

  • Alexa Fluor®色素(例: AF488、 AF647)
  • DyLight Fluor®色素
  • FITC、Cy色素、APC、R-PE
  • マルチカラー用途向けのタンデム染料

複雑な実験で強い信号強度と正確なデータを得るには、適切な 蛍光色素 を選択することが不可欠です。 蛍光色素 の選択が、装置のレーザー構成および検出チャンネルと合致していることを確認してください。

迅速かつ使いやすい標識キットを45種類以上ご用意しております

一般的には、一次抗体を標識する際は抗体のロスにつながり、貴重な実験時間を奪うことにもなりかねません。 当社の革新的な Lightning-Link® 標識 技術は、抗体やタンパク質の直接 標識 を可能にし、従来の 標識 の課題に対するシンプルなソリューションを提供します。

当社の Lightning-Link® 標識 キット は使いやすく、蛍光色素(Alexa Fluor ® および DyLight Fluor® 色素)、タンデム色素、酵素、オリゴヌクレオチド、金ナノ粒子など、45 を超える標識に対する3つの簡単なステップで抗体をコンジュゲーションできます。

効率を最大限に高め、抗体の損失を最小限に抑えるために、 Lightning-Link® 標識 キットをキャリアフリー抗体と共に使用することをお勧めします。

アプリケーションノートをこちらからダウンロードして、 Lightning-Link™ キットの一貫性のある性能に関するデータをご覧ください。

標識度とF:P比

標識度(DOL : Degree of Labeling)または 蛍光色素タンパク質 (F:P) 比は、各抗体に付着する標識分子の数を表します。 これは通常、コンジュゲートされた抗体の吸光度を測定し、標準比式を適用することによって計算されます。

DOLを最適化することは、シグナル強度と抗体性能のバランスを取るために重要です。

主な考慮事項:

  • DOLが低い – 信号が弱い
  • 高DOL – 抗原結合への潜在的な干渉
  • 最適DOL – 抗体機能を保持した強力なシグナル

DOLは、標識タイプ、抗体 濃縮、および 標識 化学に依存します。 適切な比率を維持することで、再現性と信頼性の高いアッセイ結果が得られます。

Lightning-Link™ キットの仕組み

目的の標識を含む凍結乾燥混合物のバイアルに、選択した抗体または生体分子をピペットで移し、わずか15分(Lightning-LinkTM Fastシリーズ)または約3時間(Lightning-LinkTMシリーズ)インキュベートします。   

この標識プロセスにより、抗体のロスや 精製ステップを必要とせず、再現性のある標識を行うことができます。

  • シンプルで一貫性がある:シンプルな3ステップで標識できます。従来の標識後の精製ステップにおける抗体ロスのリスクがありません。
  • 迅速で簡単:当社の標識キットはわずか30秒で作業が完了するため、研究に集中することができます。 詳細は、短いプロトコール動画をご覧ください。
  • 選択肢と柔軟性:蛍光色素や酵素から金属同位体や金ナノ粒子まで、幅広い標識物質からお選びいただけます。 当社の13,000種類の標識可能なキャリア・フリー抗体ですぐに使用でき、優れた柔軟性によってお客様の実験を設計し完了することができます。
  • Scalable and efficient: With kits that work with 10 µg-100 mg of antibody, achieve consistent conjugation whatever the scale of your experiment

酵素: ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ  | アルカリホスファターゼ
タンパク質: ビオチン | ストレプトアビジン
蛍光色素: AF®488 | AF®647 | R-PE | APC | FITC | Cy3® | Cy5®
タンデム色素: PE/Cy7® | APC/Cy7® | PE/Cy5® | PerCP/Cy5.5® | PE/Cy5.5®
オリゴヌクレオチド: 汎用
メタルアイソトープ: 169Tm | 141Pr | 160Gd | 175Lu | 165Ho
金ナノ粒子: 40 nm | 20 nm | 10 nm

Alexa Fluor® 標識キット

これらのキットは、明るく安定した蛍光で知られるAlexa Fluor®色素との抗体の簡単で信頼性の高い標識を促進します。  AF488、AF555、AF647などをご用意しています。

 
蛍光標識キット

さまざまな蛍光色素(Cy色素、ATTO、FITC、APCなど)で抗体の標識を可能にし、蛍光ベースのアプリケーションにおける可視化を強化します。 標識キットには、フローサイトメトリーアプリケーション用のさまざまなタンデム色素も用意されています。

HRPおよびアルカリホスファターゼ標識キット

酵素結合免疫検出に理想的なこれらのキットは、さまざまなアッセイのためのホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ(HRP)またはアルカリホスファターゼ(AP)と抗体を結合させます。

ビオチン化およびストレプトアビジン標識キット

ストレプトアビジンを使用して検出または捕捉できる抗体のビオチン化用に設計されたキットで、高い親和性と特異性を提供します。 

その他の標識ツール

金ナノ粒子、金属同位体、ラテックスなどで標識するためのキットなど、さまざまな追加の標識ツールをご覧ください。 

蛍光標識抗体のラインナップをご覧いただくか、抗体標識ガイドで再現可能な標識の方法をご覧ください。   

当社の専門家チームに抗体標識の委託をご検討されている場合はCustomer Conjugationサービスまでお問い合わせください。ニーズについて当社にご相談ください

ダウンストリームアプリケーションをサポート

抗体 標識 は、多くの実験ワークフローにおいて重要な役割を果たします。

標識抗体は、以下において広く使用されています。

適切なラベルを選択することで、ダウンストリームアプリケーションとの互換性が確保され、再現性が向上します。

よくある質問(FAQ)

標識化学は、リジン中およびタンパク質のN末端の第一級アミンをターゲットとします。  すべての抗体は複数の遊離アミン基を有しており、ほとんどのタンパク質はリジンおよび/またはα-アミノ基を有しています。 目的の標識を含む凍結乾燥混合物のバイアルに、抗体または生体分子をピペットで移し、約3時間(Lightning-Link™シリーズ)または15分(Lightning-Link™ Fastシリーズ)インキュベートします。

シンプルなプロトコールにもかかわらず、Lightning-Link™標識プロセスは精巧であり、抗体のロスなく再現性の高い標識を迅速に行うので、貴重な時間とリソースを節約することができます。

どの程度の回収率を期待できますか?

Lightning-Link™ 標識キットでは、抗体標識反応全体が1本のチューブ内に含まれており、分離ステップがありません。 つまり、標識プロセスの終了時に抗体の100%が保持されています。 標識プロセスは抗体凝集を誘発せず、生理学的pHで行われます。 反応が完了したら、通常はさらなる精製ステップを行わずに、標識された抗体をすぐに使用することができます。

同じ抗体を2種類のLightning-Link™ラベルで標識できますか?

いいえ。Lightning-Link™標識キットは、1種類の標識で抗体を標識するために設計されています(シングル標識)。– キットはシングル標識にのみ推奨されます。

標識の成功を確認する最善の方法は何ですか?

当社の標識チェックキットは、特殊な装置や高価な装置を使用せずに、抗体が標識されていることを簡単な手順で確認することができます。 これらのキットは、IgG抗体の定性的検証にのみ適していることに注意してください。

目的のアプリケーションで予備実験を行い、標識が成功しているか確認することもできます。

標識抗体からフリーの標識をどのように取り除きますか?

Lightning-Link™標識キットは、反応終了時にフリーの標識が少量となるように設計されています。 したがって、ろ過のステップは必要ありません。 残りのフリーの標識は、キットに付属するクエンチャーによって反応基がブロックされ、お客様のアプリケーションに含まれる洗浄ステップ中に洗い流されます。

Lightning-Link™ 標識キットは、BSA、グリセロール、トリスバッファー、防腐剤に保存されている一次抗体と一緒に使用できますか?

特定のバッファー成分は標識反応と互換性がないため、キャリア・フリーの一次抗体の使用をお勧めします。 お客様の抗体がこれらの要件を満たしていない場合、当社の精製・濃縮キットを使用して、簡単に抗体を精製・濃縮することができます。

 Lightning-Link™ 標識キットの粗血清または組織培養上清を使用できますか?

これらのキットは、精製抗体またはタンパク質のみでの使用が推奨されます。

CSTの ガイド では、抗体以外のタンパク質、ペプチド、低分子の Lightning-Link®キットを用いた標識方法について詳しく説明します。

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参考文献

  1. Lantz, L., Holmes, K. & Douagi, I. 蛍光色素と モノクローナル の結合。 Curr. 原稿 3、 e795 (2023)。
  2. マーティン、C. 鎖間 システイン 架橋またはリジンバイオコンジュゲーションに由来する抗体-蛍光色素 コンジュゲートのin vitro特性および安定性プロファイル。 医薬品 12、 176 (2019)。
  3. McCombs, J. R. & Owen, S. C. Antibody drug conjugates: design and selection of linker, payload and 標識 chemistry. リンカー、ペイロードおよびコンジュゲーション化学の設計および選択。 AAPS J. 17 アメリカ、 339–351 (2015)。

最もよく見られる標識キット

ab102859 - APC/Cy7® Conjugation Kit - Lightning-Link™

ab269889 - Europium Conjugation Kit

ab102918 - PE / R-Phycoerythrin Conjugation Kit - Lightning-Link™

ab102884 - FITC Conjugation Kit - Lightning-Link™

ab269823 - Alexa Fluor® 647 Conjugation Kit (Fast) - Lightning-Link™

ab102921 - Streptavidin Conjugation Kit - Lightning-Link™

ab102890 - HRP Conjugation Kit - Lightning-Link™

ab102903 - PE/Cy7® Conjugation Kit - Lightning-Link™

ab188285 - FITC Conjugation Kit (Fast) - Lightning-Link™

ab218260 - Oligonucleotide Conjugation Kit

ab102850 - Alkaline phosphatase Conjugation Kit - Lightning-Link™

ab154873 - Gold Conjugation Kit (40nm, 20 OD)

ab188287 - Cy3® Conjugation Kit (Fast) - Lightning-Link™

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ab186864 - Streptavidin Gold Conjugate (40nm, 10 OD)

ab188288 - Cy5® Conjugation Kit (Fast) - Lightning-Link™

ab201796 - Biotinylation Kit / Biotin Conjugation Kit (Fast, Type B) - Lightning-Link™

ab201807 - APC Conjugation Kit - Lightning-Link™

ab236553 - Alexa Fluor® 488 Conjugation Kit (Fast) - Lightning-Link™

ab201795 - Biotinylation Kit / Biotin Conjugation Kit (Fast, Type A) - Lightning-Link™

ab270703 - 5’ Feature Barcode抗体標識キット – Lightning-Link™ -オリゴ 1-10

ab269821 - Alexa Fluor® 568 Conjugation Kit (Fast) - Lightning-Link™

ab201798 - DyLight® 405 Conjugation Kit (Fast) - Lightning-Link™