抗体標識 とは何ですか?また、どのように作用しますか?
抗体標識とは、抗体に特定のタグを化学的に結合させることです。 標識済み一次抗体を使用した場合、目的のターゲット抗原を直接検出できるため、二次抗体は必要ありません。
標識には蛍光色素、酵素、タンパク質などを使用でき、標識の選択や組み合わせは、実験で使用するアプリケーション(マルチプレックスIHC、フローサイトメトリー、LFAなど)やマルチプレックスパネルによって異なります。
直接標識した一次抗体を使用することで、時間を大幅に節約し、実験プロトコールを簡素化することができます。
抗体標識における蛍光色素の選択
蛍光色素は、特にフローサイトメトリー、 免疫蛍光染色、マルチプレックスイメージングなどの 蛍光ベースのアプリケーションにおいて、 抗体標識で最も広く使用されている標識の1つです。
蛍光色素を選択する際、考慮すべき主な要因は次のとおりです。
- 励起および 放出 スペクトル(機器の互換性)
- 明るさと光安定性
- マルチプレックスパネルのスペクトルオーバーラップ
- アッセイとの互換性
一般的な 蛍光色素 オプションには、以下が含まれます。
- Alexa Fluor®色素(例: AF488、 AF647)
- DyLight Fluor®色素
- FITC、Cy色素、APC、R-PE
- マルチカラー用途向けのタンデム染料
複雑な実験で強い信号強度と正確なデータを得るには、適切な 蛍光色素 を選択することが不可欠です。 蛍光色素 の選択が、装置のレーザー構成および検出チャンネルと合致していることを確認してください。
迅速かつ使いやすい標識キットを45種類以上ご用意しております
一般的には、一次抗体を標識する際は抗体のロスにつながり、貴重な実験時間を奪うことにもなりかねません。 当社の革新的な Lightning-Link® 標識 技術は、抗体やタンパク質の直接 標識 を可能にし、従来の 標識 の課題に対するシンプルなソリューションを提供します。
当社の Lightning-Link® 標識 キット は使いやすく、蛍光色素(Alexa Fluor ® および DyLight Fluor® 色素)、タンデム色素、酵素、オリゴヌクレオチド、金ナノ粒子など、45 を超える標識に対する3つの簡単なステップで抗体をコンジュゲーションできます。
効率を最大限に高め、抗体の損失を最小限に抑えるために、 Lightning-Link® 標識 キットをキャリアフリー抗体と共に使用することをお勧めします。
アプリケーションノートをこちらからダウンロードして、 Lightning-Link™ キットの一貫性のある性能に関するデータをご覧ください。
標識度とF:P比
標識度(DOL : Degree of Labeling)または 蛍光色素タンパク質 (F:P) 比は、各抗体に付着する標識分子の数を表します。 これは通常、コンジュゲートされた抗体の吸光度を測定し、標準比式を適用することによって計算されます。
DOLを最適化することは、シグナル強度と抗体性能のバランスを取るために重要です。
主な考慮事項:
- DOLが低い – 信号が弱い
- 高DOL – 抗原結合への潜在的な干渉
- 最適DOL – 抗体機能を保持した強力なシグナル
DOLは、標識タイプ、抗体 濃縮、および 標識 化学に依存します。 適切な比率を維持することで、再現性と信頼性の高いアッセイ結果が得られます。
Lightning-Link™ キットの仕組み
目的の標識を含む凍結乾燥混合物のバイアルに、選択した抗体または生体分子をピペットで移し、わずか15分(Lightning-LinkTM Fastシリーズ)または約3時間(Lightning-LinkTMシリーズ)インキュベートします。
この標識プロセスにより、抗体のロスや 精製ステップを必要とせず、再現性のある標識を行うことができます。
Lightning-LinkTM 抗体標識技術の利点
- シンプルで一貫性がある:シンプルな3ステップで標識できます。従来の標識後の精製ステップにおける抗体ロスのリスクがありません。
- 迅速で簡単:当社の標識キットはわずか30秒で作業が完了するため、研究に集中することができます。 詳細は、短いプロトコール動画をご覧ください。
- 選択肢と柔軟性:蛍光色素や酵素から金属同位体や金ナノ粒子まで、幅広い標識物質からお選びいただけます。 当社の13,000種類の標識可能なキャリア・フリー抗体ですぐに使用でき、優れた柔軟性によってお客様の実験を設計し完了することができます。
- Scalable and efficient: With kits that work with 10 µg-100 mg of antibody, achieve consistent conjugation whatever the scale of your experiment
最も使用されている標識キットをご覧ください。
酵素: ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ | アルカリホスファターゼ
タンパク質: ビオチン | ストレプトアビジン
蛍光色素: AF®488 | AF®647 | R-PE | APC | FITC | Cy3® | Cy5®
タンデム色素: PE/Cy7® | APC/Cy7® | PE/Cy5® | PerCP/Cy5.5® | PE/Cy5.5®
オリゴヌクレオチド: 汎用
メタルアイソトープ: 169Tm | 141Pr | 160Gd | 175Lu | 165Ho
金ナノ粒子: 40 nm | 20 nm | 10 nm
Alexa Fluor® 標識キット
これらのキットは、明るく安定した蛍光で知られるAlexa Fluor®色素との抗体の簡単で信頼性の高い標識を促進します。 AF488、AF555、AF647などをご用意しています。
蛍光標識キット
さまざまな蛍光色素(Cy色素、ATTO、FITC、APCなど)で抗体の標識を可能にし、蛍光ベースのアプリケーションにおける可視化を強化します。 標識キットには、フローサイトメトリーアプリケーション用のさまざまなタンデム色素も用意されています。
HRPおよびアルカリホスファターゼ標識キット
酵素結合免疫検出に理想的なこれらのキットは、さまざまなアッセイのためのホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ(HRP)またはアルカリホスファターゼ(AP)と抗体を結合させます。
ビオチン化およびストレプトアビジン標識キット
ストレプトアビジンを使用して検出または捕捉できる抗体のビオチン化用に設計されたキットで、高い親和性と特異性を提供します。
金ナノ粒子、金属同位体、ラテックスなどで標識するためのキットなど、さまざまな追加の標識ツールをご覧ください。
蛍光標識抗体のラインナップをご覧いただくか、抗体標識ガイドで再現可能な標識の方法をご覧ください。
当社の専門家チームに抗体標識の委託をご検討されている場合はCustomer Conjugationサービスまでお問い合わせください。ニーズについて当社にご相談ください。
ダウンストリームアプリケーションをサポート
抗体 標識 は、多くの実験ワークフローにおいて重要な役割を果たします。
標識抗体は、以下において広く使用されています。
適切なラベルを選択することで、ダウンストリームアプリケーションとの互換性が確保され、再現性が向上します。
よくある質問(FAQ)