リコンビナント抗体：限界への挑戦
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リコンビナント抗体で研究を着実に進める準備をしませんか？
概要
- リコンビナント抗体とは何か、どのようにしてつくられるのか？
- リコンビナント抗体のメリット
- リコンビナント抗体の包括的なラインナップから興味のある抗体を探してみませんか
- リコンビナント抗体がお客様に愛される理由
リコンビナント抗体とは何か、どのようにしてつくられるのか？
リコンビナント抗体の生産は、免疫特異的な重抗体鎖および軽抗体鎖の抗体遺伝子を高収量発現ベクターにクローニングすることにより、インビトロで行われます。次に、これらのベクターを発現宿主（例えば、細菌、酵母、または哺乳類）に導入し、リコンビナント抗体を産生します。リコンビナント抗体は、従来のモノクローナル抗体と同様にお使いいただくことができます。
比較すると、モノクローナル抗体は、通常、免疫化された動物のB細胞を用いて、所望の抗体クローンを分泌する不死身のハイブリドーマ細胞を形成して作製されます。この技術は、非常に一貫性があり、特異的で感度の高いモノクローナル抗体を大量に生産することができますが、時間の経過とともにハイブリドーマ細胞株に遺伝的に変異が生じ、生産される抗体にわずかなばらつきがうまれることがあります。毒素、ヌクレオチド、膜結合タンパク質などの難しい標的に対する抗体も、このin vivoモデルで常に作製できるわけではありません。
リコンビナント抗体の利点
リコンビナント抗体は、従来の抗体製造の限界を克服し、ロット間で最高レベルの一貫性、他の追随を許さない再現性、確認済みの特異性、長期供給の保証を提供します。
最高レベルの一貫性と比類なき再現性
リコンビナント抗体は、遺伝子のユニークなセットから開発されるので、リコンビナント抗体の生産は制御されており、信頼性が高い。ハイブリドーマ生産におけるいくつかの問題、例えば遺伝子の損失、遺伝子変異、細胞株の紛失を回避することができます。これにより、非常に高いロット間の一貫性を持つ抗体が得られ、研究や医薬品開発研究で必要とされる再現性の高い結果を得ることができます。
- 図1. アブカムの 抗Bcl-XL組換えウサギモノクローナル抗体-ab178844 （左）と、頻繁に引用されている競合他社の抗Bcl-XLウサギポリクローナル抗体（右）によるウエスタンブロット（複数のサンプルタイプでテスト）の結果。ウエスタンブロットプロトコール（英語）もご覧ください。
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特異性の確認（3183製品以上がKO評価済み）
リコンビナント技術では、抗体工学的に抗体の感度を向上させることが容易になります。目的クローンのスクリーニングプロセスは、ハイブリドーマとリコンビナントクローニングの両段階で行われ、最も好ましい品質の抗体を取得できます。
特異性の確認ために、ノックアウト検証を含む広範な検証方法を使用しています。下の例では、ノックアウトサンプルのレーンにおいて予想される分子量のバンドが消失しています。リコンビナント抗体と他のタイプの抗体との特異性の違いを示しています。
図2. 当社のリコンビナント抗TLE 1抗体[EPR9386(2)]（左）と、モノクローナル抗TLE 1抗体[OTI1F5]（右）を使用し、ノックアウトおよび野生型サンプルでのウエスタンブロットの結果。
図3. アブカムのリコンビナント抗GRIM19 [EPR4471(2)]抗体（左）と、モノクローナル抗GRIM19 [6E1BH7]抗体を使用したノックアウトおよび野生型のサンプルでのウエスタンブロットの結果。
高い親和性、異なるロット間での一貫性
KD 値は抗体の親和性の定量的な指標です。KD 値が低いほど、抗体の親和性が高いことを示します。平均して、当社のリコンビナントRabMab抗体のKD 値はピコモル（10-10-10-12）の範囲にあり、これは非常に親和性が高いと考えられます（863のRabMAb抗体のデータ（英語））。
高親和性の抗体は、低親和性の抗体と比較して、抗原と強く結合し、厳しい条件下でも結合が維持されるため、アッセイにおいてより高い感度を可能にします。 我々のリコンビナント抗PDL1抗体のKD値を分析すると、その親和性は5つの異なるロット間において、高いままであることがわかります（表1）。
抗体 | kon(1/Ms) | kdis(1/s) | KD (M) | Full R^2 |
PD-L1_batch 1 | 8.22E+05 | 3.90E-05 | 4.74E-11 | 0.999 |
PD-L1_batch 2 | 6.17E+05 | 2.36E-05 | 3.83E-11 | 0.9997 |
PD-L1_batch 3 | 6.92E+05 | 1.41E-05 | 2.04E-11 | 0.9991 |
PD-L1_batch 4 | 6.14E+05 | 1.48E-05 | 2.40E-11 | 0.9996 |
PD-L1_batch 5 | 7.21E+05 | 1.54E-05 | 2.13E-11 | 0.9994 |
表1. 当社のリコンビナント抗PD-L1抗体[28-8]（ab205921）の5つの異なるロットのKD値の分析。KD値の詳細については、KDガイド（英語）をご覧ください。
拡張性の高さと継続的な供給力
抗体遺伝子が単離され、配列が明らかになっていれば、どのような規模でも抗体の発現を行うことができ、抗体の長期供給が保証されます。 このため、リコンビナント抗体は長期的な研究や、複数のサンプル間で同じ抗体を使用する場合に最適なソリューションとなります。
アニマルフリー（動物由来成分不使用）でのハイスループット生産
抗体産生遺伝子を単離してしまえば、アニマルフリーのin vitro環境下での生産が可能です。当社のファージディスプレイ技術を用いて作製された抗体については、抗体の遺伝子さえもアニマルフリーの手順で単離することができます。
リコンビナント抗体の包括的なラインナップから興味のある抗体を探してみませんか
アブカムのリコンビナント抗体がお客様に愛される理由
弊社のリコンビナント抗体は、50,000以上の論文に掲載されています。
"長期研究や私たちのようなサービスラボでは、多くのサンプルに同じ抗体を使用することがよくあります。ロット間の一貫性を保つことは非常に重要です。私たちは、新しい抗体のロットを受け取る際には、常に自分たちでテストしています。私がアブカムのRabMAb®を気に入っている理由の一つは、常に同じように動作するため、プロトコールの最適化の必要がほとんどないことがあげられます"
"すべてのリコンビナント抗体は、ポリクローナル抗体と比較して、より特異的でクリアなバンドを示しました。また、必要なタンパク質量も少なくすみ、その品質と得られたデータは一貫して良いものでした"
"以前からいくつかの抗H3K27M抗体を試していましたが、H3K27M陽性細胞と非特異的シグナルの区別が難しいことがよくありました。H3K27M RabMAb®抗体は、非常に低いバックグラウンドでH3K27Mタンパク質をより特異的かつ高感度に検出することができました"