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二次抗体は、間接検出法で、一次抗体に結合する抗体です。通常、二次抗体には、蛍光色素(Alexa Fluor®色素など)、酵素(HRP(英語)、アルカリホスファターゼなど)またはビオチン(英語)などが標識されています。二次抗体は宿主動物に別種の抗体を免疫して作製されます。例えば、ヤギにウサギIgGを免疫してヤギ抗ウサギIgG二次抗体を作製します。
実験で二次抗体を選択する際は、一次抗体を作製した動物種とその一次抗体のアイソタイプを一致させる必要があります。例えば、先に述べたヤギ抗ウサギIgG二次抗体は、一次抗体がウサギIgGの場合のシグナルの検出に使用することができます。当社の二次抗体選択ガイドは、実験に合った二次抗体の選択をサポートします。
最も使用されている動物種別二次抗体は以下からご覧いただけます。
ヤギ抗ウサギIgG:AF®488 | AF®647 | AF®594 |HRP
ヤギ抗マウスIgG:AF®488 | AF®647 |HRP
ロバ抗ウサギIgG:AF®488 | AF®647
ロバ抗マウスIgG:AF®488 | AF®647
吸着済み:ヤギ抗マウスAF®488 | ヤギ抗ウサギAF®647 | ロバ抗ラットAF®647
このガイドは、ご使用のアプリケーションに最も適切な二次抗体の選択をサポートします。
Alexa Fluor®488は、フルオレセインイソチオシアネート(FITC)に比べて蛍光強度が高く、光安定性に優れています。比較についてはこちらをご覧ください。
直接免疫染色法と間接免疫染色法の違いについては、こちらをご覧ください。
Alexa Fluor®標識二次抗体が多重染色実験に最適な理由については、こちらをご覧ください。
免疫組織化学(IHC)における時間の削減、高い感受性、内在性ビオチンバックグラウンドの低減については、こちらをご覧ください。(英語)
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