SimpleStep ELISA®キット
Related
高感度ELISAが、洗浄1回、アッセイ時間90分で性能を損なうことなく実施できます。
- 洗浄1回、簡単なプロトコールにより、アッセイ時間を90分以内に短縮
- 高品質抗体の使用により、高い感度、特異性、再現性を実現
- 生体サンプルですべて検証済み
- 96ウェルプレート形式、12 × 8ウェルに分離可能
- 10 個入りパックおよび 384 ウェルフォーマットが利用可能
目次
- SimpleStep ELISA®とは？
- SimpleStep ELISA®の仕組み
- SimpleStep ELISA®キットにリコンビナント抗体を使用する理由
- 高い感度を実現
- 国際標準でキャリブレーション済み
- ハイスループットスクリーニング（HTS）とSimpleStep ELISA®
- SimpleStep ELISAとSPECTROstar®Nano
- SimpleStep ELISAキットとPHERAstar FSX
- 分析対象
SimpleStep ELISA®とは？
SimpleStep ELISA®の仕組み
SimpleStep ELISA とは
SimpleStep ELISA® とはアブカムが開発した、操作がシンプルで時間が短く、そして特異性も感度も高いという、理想的とも言えるサンドイッチ ELISA キットです。
あなたの ELISA をアップグレードできます
| これまでの ELISA キット | SimpleStep ELISA® キット | ||
| 感度 | ●● | ●●●● | プレート表面ではなく、液中での反応システムであるため、より高い感度に |
| 再現性 | ●● | ●●●● | キットには、リコンビナント抗体が採用されており、抜群の再現性を実現 |
| フル・バリデーション | ● | ●●●● | 様々なタイプの生物サンプルでテストされており、内在性タンパク質へ反応が確実 |
| 簡単なプロトコールとアッセイ時間の短さ | ●●●● | 洗浄は1回のみ、アッセイ時間は90分間 |
＞ ELISA ガイドブックをこちらからダウンロードいただけます。
SimpleStep ELISA はどのようにワークするのか?
通常のサンドイッチ ELISA キットはマルチ・ステップであり、まずウェルにサンプルを加えて一次反応を行い、洗浄後標識抗体を加えて二次反応を行い、それから発色・検出を行います（アビジン－ビオチン反応を利用した三次反応が必要なキットもあります）。これに対しシングル・ステップである SimpleStep ELISA キットでは、ウェルにサンプルと標識抗体などの試薬を同時に加えて一回反応を行うだけです。洗浄後すぐに発色・検出の操作に移ります。
マルチ・ステップのサンドイッチ ELISA で形成される「サンドイッチ」は、固相抗体：ターゲット物質：酵素標識抗体です。一方 SimpleStep ELISA キットで形成される「サンドイッチ」は、エピトープ・タグ標識抗体：ターゲット物質：酵素標識抗体です。ウェルにはエピトープ・タグに対する抗体が固相化されており、その固相抗体がエピトープ・タグを介して形成されたサンドイッチを捕捉します。このサンドイッチ形成とウェルへの捕捉を 1 回の反応で行っているわけです（図 1）。
図1. SimpleStep ELISA®キットでは、ターゲット-捕捉抗体と検出抗体のサンドイッチ複合体が溶液中に形成され、このサンドイッチペアは捕捉抗体に結合したアフィニティータグを介してマイクロプレートに結合します。SimpleStep ELISAの仕組みについて、ビデオをご覧ください。
従来のサンドイッチELISAでは、ターゲット・タンパク質の少なくとも2つの異なる部位に結合する抗体ペアを使用します。捕捉抗体はマイクロプレートのウェルにあらかじめコーティングされ、ターゲット・タンパク質に選択的に結合します。洗浄後、検出抗体を添加します。検出抗体はターゲット・タンパク質の別の（2つ目の）部位に結合し、サンドイッチ複合体を形成します。
SimpleStep ELISAキットでは、このプロセスにCaptSure™システム（洗浄1回で抗体-ターゲットのサンドイッチ複合体を形成させるセミホモジニアスなシステム）を使用しています。わずか1回のインキュベーションと洗浄ステップで、完全なサンドイッチ複合体をウェル内に形成し、免疫親和性タグによりプレートに固相化します（図1）。
ELISAのアップグレード
SimpleStep ELISA®の特長 | 利点 |
リコンビナント抗体による高い感度、再現性、特異性 | 最初の実験から一貫して信頼できる結果 |
生体サンプルで検証済み | 内在性タンパク質との確かな反応 |
洗浄1回、迅速（90分）で標準化されたプロトコール | SimpleStep ELISA®の全キットにわたり迅速かつ簡易なプロトコールのため、エラーのリスクを低減 |
96ウェルプレート形式、12 × 8ウェルに分離可能 | 残った試薬は使い回せるため、無駄がない 1つのキットで小規模の複数の実験が可能 |
10パックサイズが利用可能 | 同一ロットでの提供を保証 |
競合SimpleStep ELISA®
競合SimpleStep ELISA®キットは、サンドイッチSimpleStep ELISAキットと同様のスピードとシンプルさを兼ね備えたキットです。プロトコールのステップ数が少なく、アッセイ時間は90分です。
サンドイッチELISA®では1つのエピトープしか認識できませんが、競合SimpleStep ELISA®キットを使用することで、サンドイッチELISA®では測定できない低分子やホルモンを検出することができます。
アブカムの競合SimpleStep ELISA®キットではアフィニティータグを使用しており、このタグをSimpleStep ELISA®プレートに固相化されたモノクローナル抗体が認識します。この競合ELISA®では、抗原抗体複合体をワンステップで形成できるため、アッセイ時間を大幅に短縮することができます。
抗原ダウンフォーマットでは、CaptSure™アフィニティータグ付き抗原とサンプル中の非標識抗原が競合してHRP標識済み捕捉抗体に結合します。抗体ダウンフォーマットでは、HRP標識済み抗原とサンプル中の非標識抗原が競合してCaptSure™アフィニティータグ付き捕捉抗体に結合します。CaptSure™アフィニティータグ付きの抗原または抗体は、SimpleStep ELISA®プレートに結合します。標識済み抗原のみを添加したアッセイウェルと比べてシグナルが減少した場合、サンプル中に抗原が存在することを示します。
