ヒストン・メチル化のアッセイ

ヒストン・メチル化酵素および脱メチル化酵素の測定



ヒストン・メチルトランスフェラーゼ活性測定(HMT アッセイ)

ヒストン・メチル化酵素(ヒストン・メチルトランスフェラーゼ; Histone methyltransferase; HMT)の活性測定系(HMT アッセイ)の構築は、kcat が低く(ターン・オーバー 1 min-1 以下)、またメチル供与体である S-アデノシルメチオニン(S-adenosylmethionine; SAM)との KM 値が低いため、簡単ではありません。現在 HMT アッセイの多くは、メチル化反応の副生成物である S-アデノシルホモシステイン(SAH)の量を測定することにより行われますが、SAH の生成が HMT に特異的ではない、精製されたタンパク質やタンパク質複合体しかサンプルとして使用できない、ラジオアイソトープを使用する(一部アッセイ)、といった問題があります。

アブカムの HMT アッセイは、メチル化産物を検出する特異的抗体を使用し、上記のような問題を克服したキットです。

  • 核抽出物をサンプルとして使用できる(精製タンパク質である必要はない)。
  • ラジオアイソトープは使用しない。
  • マイクロプレート・フォーマットで、測定は比色もしくは蛍光。
  • 操作がシンプルで、アッセイは 3 時間以内に完了する。


測定活性

製品名

製品番号

ヒストン H3 の K4 のメチル化

Histone H3 (K4) Methyltransferase Activity Quantification Assay Kit

ab113452

ヒストン H3 の K9 のメチル化

Histone H3 (K9) Methyltransferase Activity Quantification Assay Kit

ab113453

ヒストン H3 の K27 のメチル化

Histone H3 (K27) Methyltransferase Activity Quantification Assay Kit

ab113454



ヒストン・デメチラーゼ活性測定

ヒストン・デメチラーゼ活性は多くの場合、脱メチル化の副生成物であるホルムアルデヒドを定量することによって行います。この方法は、界面活性剤、チオール基、各種イオンなど、多くの物質によって影響を受けやすい、精製されたタンパク質しかサンプルとして使用できない、といった問題がありました。

アブカムのヒストン・デメチラーゼ活性測定キットは、脱メチル化産物を検出する特異的抗体を使用し、上記のような問題を克服したキットです。

  • 感度が高い(ホルムアミドを測定する方法の 20 - 1000 倍)。
  • 界面活性剤、チオール基、各種イオンの影響を受けにくい。
  • 核抽出物をサンプルとして使用できる(精製タンパク質である必要はない)。
  • マイクロプレート・フォーマットで、測定は比色もしくは蛍光。
  • 操作がシンプルで、アッセイは 3 時間以内に完了する。


測定活性


製品名


製品番号

ヒストン H3K4me2 の脱メチル化

Histone Demethylase (H3K4) Activity Quantification Assay Kit

ab113455

KDM1 / LSD1 によるヒストン H3K4me2 および H3K4me3 の脱メチル化

KDM1/LSD1 Activity Quantification Assay Kit (Colorimetric) 

KDM1/LSD1 Activity Quantification Assay Kit (Fluorometric)

ab113459

​                                          

ab113460

KDM4A/JHDM3A/JMJD2A、KDM4B/JMJD2B、KDM4C/GASC1/JMJD2C、KMD4D/JMJD2D による ヒストン H3K9me3 の脱メチル化

KDM4/JMJD2 Activity Quantification Assay Kit (Colorimetric)

KDM4/JMJD2 Activity Quantification Assay Kit (Fluorometric)

ab113461


ab113462

KDM5/JARID による ヒストン H3K4me2 および H3K4me3 の脱メチル化

KDM5/JARID Activity Quantification Assay Kit (Colorimetric) 

KDM5/JARID Activity Quantification Assay Kit (Fluorometric)

ab113463

       ​

ab113464

KDM6A/UTX  と  KDM6B/JMJD3 によるヒストン H3K27me3 の脱メチル化

KDM6A/KDM6B Activity Quantification Assay Kit (Colorimetric) 

KDM6A/KDM6B Activity Quantification Assay Kit (Fluorometric)

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ab156911


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