製品の概要

  • 製品名
    Human Von Willebrand Factor ELISA Kit (VWF)
    Von Willebrand Factor キット 製品一覧
  • 検出方法
    Colorimetric
  • 再現性
    Intra-Assay(同時再現性)
    サンプル N 平均値 SD CV%
    Overall 5%
    Inter-Assay(日差再現性)
    サンプル N 平均値 SD CV%
    Overall 7.1%
  • サンプルの種類
    Cell culture supernatant, Serum, Plasma
  • アッセイタイプ
    Sandwich (quantitative)
  • 検出感度
    = 2.5 mU/ml
  • 検出範囲
    2.5 mU/ml - 80 mU/ml
  • 添加回収試験

    99 %

  • 全工程の試験時間
    5h 00m
  • ステップ
    Multiple steps standard assay
  • 種交差性
    交差種: Human
  • 製品の概要

    Human Von Willebrand Factor (VWF) in vitro ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) kit is designed for the quantitative measurement of Human Von Willebrand Factor in plasma, serum, and cell culture supernatants.


    A Von Willebrand Factor specific antibody has been precoated onto 96-well plates and blocked. Standards or test samples are added to the wells and subsequently a Von Willebrand Factor specific biotinylated detection antibody is added and then followed by washing with wash buffer. Streptavidin-Peroxidase Conjugate is added and unbound conjugates are washed away with wash buffer. TMB is then used to visualize Streptavidin-Peroxidase enzymatic reaction. TMB is catalyzed by Streptavidin-Peroxidase to produce a blue color product that changes into yellow after adding acidic stop solution. The density of yellow coloration is directly proportional to the amount of Von Willebrand Factor captured in plate.


    Get higher sensitivity in only 90 minutes with Human Von Willebrand Factor ELISA Kit (ab189571) from our SimpleStep ELISA® range.

  • アプリケーション
    適用あり: Sandwich ELISAmore details
  • 試験プラットフォーム
    Microplate

製品の特性

  • 保存方法
    Store at -20°C. Please refer to protocols.
  • 内容 1 x 96 tests
    100X Streptavidin-Peroxidase Conjugate 1 x 80µl
    10X Diluent N Concentrate 1 x 30ml
    20X Wash Buffer Concentrate 2 x 30ml
    50X Biotinylated Human Von Williebrand Factor Antibody 1 x 120µl
    Chromogen Substrate 1 x 8ml
    Sealing Tapes 3 units
    Stop Solution 1 x 12ml
    Von Williebrand Factor Microplate (12 x 8 well strips) 1 unit
    Von Williebrand Factor Standard 1 x 2 vials
  • 研究分野
  • 機能
    Important in the maintenance of hemostasis, it promotes adhesion of platelets to the sites of vascular injury by forming a molecular bridge between sub-endothelial collagen matrix and platelet-surface receptor complex GPIb-IX-V. Also acts as a chaperone for coagulation factor VIII, delivering it to the site of injury, stabilizing its heterodimeric structure and protecting it from premature clearance from plasma.
  • 組織特異性
    Plasma.
  • 関連疾患
    Defects in VWF are the cause of von Willebrand disease (VWD) [MIM:277480]. VWD defines a group of hemorrhagic disorders in which the von Willebrand factor is either quantitatively or qualitatively abnormal resulting in altered platelet function. Symptoms vary depending on severity and disease type but may include prolonged bleeding time, deficiency of factor VIII and impaired platelet adhesion. Type I von Willebrand disease is the most common form and is characterized by partial quantitative plasmatic deficiency of an otherwise structurally and functionally normal Willebrand factor; type II is associated with a qualitative deficiency and functional anomalies of the Willebrand factor; type III is the most severe form and is characterized by total or near-total absence of Willebrand factor in the plasma and cellular compartments, also leading to a profound deficiency of plasmatic factor VIII.
  • 配列類似性
    Contains 1 CTCK (C-terminal cystine knot-like) domain.
    Contains 4 TIL (trypsin inhibitory-like) domains.
    Contains 3 VWFA domains.
    Contains 3 VWFC domains.
    Contains 4 VWFD domains.
  • ドメイン
    The von Willebrand antigen 2 is required for multimerization of vWF and for its targeting to storage granules.
  • 翻訳後修飾
    All cysteine residues are involved in intrachain or interchain disulfide bonds.
    N- and O-glycosylated.
  • 細胞内局在
    Secreted. Secreted > extracellular space > extracellular matrix. Localized to storage granules.
  • Information by UniProt
  • 別名
    • Coagulation factor VIII
    • Coagulation factor VIII VWF
    • F8VWF
    • Factor VIII related antigen
    • von Willebrand antigen 2
    • von Willebrand antigen II
    • Von Willebrand disease
    • VWD
    • vWF
    • VWF_HUMAN
    see all
  • 参照データベース

アプリケーション

Our Abpromise guarantee covers the use of ab108918 in the following tested applications.

The application notes include recommended starting dilutions; optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

アプリケーション Abreviews 特記事項
Sandwich ELISA Use at an assay dependent dilution.

画像

  • VWF measured in biological fluids with background signal subtracted (duplicates +/- SD). There is limited cross-reactivity in mouse (< 2%) and rat samples (< 15%).

  • Representative Standard Curve using ab108918

プロトコール

参考文献

This product has been referenced in:
  • Wang W  et al. Controlled release hydrogen sulfide delivery system based on mesoporous silica nanoparticles protects graft endothelium from ischemia-reperfusion injury. Int J Nanomedicine 11:3255-63 (2016). Read more (PubMed: 27486324) »
  • Liu Y  et al. The role of von Willebrand factor as a biomarker of tumor development in hepatitis B virus-associated human hepatocellular carcinoma: a quantitative proteomic based study. J Proteomics 106:99-112 (2014). Read more (PubMed: 24769235) »
See all 7 Publications for this product

レビューと Q&A

1-10 of 21 Abreviews or Q&A

Question
Answer


1 IU/ml = 1000 mU/ml

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Question
Answer

I can confirm that the ELISA kits ab108918 and ab168548 are identical apart from ab168548 has a positive and negative plasma control included. The antibodies used in both of these kits are indeed the same.

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Answer

Unfortunately I will not be able to send you a sample kit for testing purpose because this is against the company guidelines. All our product are vigorously tested in compatible samples and are fully guaranteed so if journal has any problem we can provide certificate of compliance which explain the kit will do what the datasheet say.

Once again I am sorry we will not be able to provide you free samples for testing. I can however provide Abtrial offer code if the kits are going to be used in samples or species not listed on the datasheet. By participating in our 100% Abtrial discount programme - a free product can be claimed in exchange of review for this antibody. Please contact me for code if you accept our offer. Please note that purchase for the first kit is necessary.

More details about the offer can be found at the following link;

https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=resource&rid=11998&viapagetrap=collaborationdiscount

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Answer

Thank you for contacting us and making us aware of the typo in our protocol.

The corrected text on pg.8 of protocol last sentence of 3. Standard Curve which used to read: Diluent serves as the zero standard (0 µg/ml), now reads: “Diluent serves as the zero standard (0 mU/ml).” I hope this change helps with any confusion which may have arisen.

I have also been in touch with the lab as from what I have been able to determine vWF is reported in international units (IU), either as international units per deciliter (IU/dL) or as international units per milliliter (IU/mL). Most laboratories choose IU/dL however it is listed here a mU/ml. The protocol also switches from U to IU when describing reference values. I asked if these units were the same and if there is a conversion factor.

The U and IU is the same in the insert. It is easy to convert from 1 mU/ml = 100 mU/DL. DL is more clinical used unit; ml is more research and scientific use. It will not affect the calculation and reporting of your data.


I hope this information is helpful to you. Please do not hesitate to contact us if you need any more advice or information.



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https://www.abcam.com/abreviews

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Answer

Merci beaucoup pour votre émail et votre retour. Nous sommes très heureux de savoir que le problème s'est donc expliqué et résolu.

J'espère que vous avez bien reçu le kit complémentaire hier. N'hésitez pas à nous contacter de nouveau si vous avez quoi que ça soit comme problème ou si vous avez d'autres questions.

Je vous souhaite bon succès avec votre recherche.

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Answer

Merci de votre patience.

Voici les réponses à vos questions:

Le laboratoire à confirmé que c'est normal de voir des cristaux aussi dans le tampon du diluant. S'il y à des cristaux dans le tampon, nous conseillons de laisser le tampon s'équilibrer à température ambiante et de l’agiter doucement jusqu'à ce que les cristaux se sont dissolus.

Nous pouvons aussi confirmer que ce kit reconnait les polymères de hauts poids moléculaires etceux debas poids moléculaire. Les épitopes exactes des anticorps ne sont pas connus par contre.

J'espère que ces informations vous sont utiles. N'hésitez pas à nous recontacter si vous avez des autres questions. Nous vous serions aussi reconnaissants si vous nous pourriez confirmer quele problème obtenu avec les courbes de standards du kit ab108918 s'est résolu.

Merci pour votre coopération. Nous vous souhaitons bonne continuation dans votre recherche.

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Answer

Merci beaucoup pour votre émail.

Nous allons vous envoyer le kit lundi, vous devriez le recevoir donc mardi de la semaine prochaine. Veuillez s'il vous plaît nous tenir aussi au courant, sile problème est complètementrésolu.

Je suis désolée de ne pas encore pouvoir vous répondre par rapport à votre question des agrégats, j'ai déjà envoyé un rappel. Je vous tiens au courant.

Ma collègue , qui est le product manager de ces kits ELISA,m'as aussi demandé de vous envoyer le lien pour recevoir des remises suite à un retour sur nos kits ELISA. Veuillez s'il vous plaît consulter le lien suivant si ceci peux vous intéresser. https://www.abcam.com/ELISAbpoints

Je vous remercie encore une fois de votre coopération et en attendant de vos nouvelles, je vous souhaite une très agréable fin de semaine.

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Answer

Merci pour votre émail et votre patience.

Je peux vous confirmer qu'il s'agit d'une erreur d'annotation. Effectivement, les standards que vous avez reçu dans le kit lot GR79395 ne sont pas à 50mU, mais à 160mU.

Je suis très désolée de cette erreur. Veuillez croire que ceci ne correspond pas au standard que nous attendons de nos produits et que nous continuons à investiguer l'origine de ce problème pour que ça n'arrive plus.

Pouvez vous s'il vous plaît me confirmer que si vous adaptez vos calculs en utilisant le standard à 160mU, que vous obtenez les résultats attendus? Merci beaucoup.

Nous allons aussi vous envoyer un kit gratuit, afin de vous récompenser pour ces inconvenances. Veuillez s'il vous plaît me confirmer que vous voudriez bien accepter un kit gratuit.

Encore une fois, veuillez accepter toutes nos excuses pour cette erreur. Je me réjouis de votre retour.

Malheureusement, je n'ai pas encore reçu une confirmation par rapport à votre autre question, je vais vous recontacter pour ceci dès que je l'ai reçu.

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Question

Bonjour,

J'ai utilisé depuis plusieurs mois maintenant plusieurs lots successifs du kit ELISA de dosage du facteur de Willebrand. En dehors d'un problème avec le premier kit acheté visiblement défectueux (mail du 9/1/2012), tous les autres dosages se sont bien passés. En particulier le changement de kit et de lot n'entrainait pas de modification majeure dans les résultats. Le standard fourni était habituellement dosé à 120 mU ou 160 mU selon les kits et je diluais en conséquence ce standard pour obtenir le premier point de la gamme d'étalonnage de 80 mU/mL (conformément aux recommandations du kit).

J'ai passé commande de 3 nouveaux kits il y a quelque jours. Ces trois kits appartiennent au même lot : xx. Le standard fourni est dosé à 50 mU. Je l'ai dilué dans 625 µL de diluant pour obtenir le premier point de la gamme à 80 mU/mL. Les résultats obtenus en terme de densité optique sont complètement différent des autres points à 80 mU/mL obtenus dans les expérimentations précédentes avec les anciens kits.

Pour exemple voici des valeurs de DO obtenues sur la même plaque ELISA (celle du nouveau lot) de façon simultanée

Standard 80 mU/mL préparé à partir du nouveau kit : DO= 2277
Standard 80 mU/ml préparé à partir d'un ancien kit : DO=1215 (valeur totalement compatible avec les expérimentations des 3 derniers mois).

Ce standard servant à préparer la courbe de calibration, les données obtenues au final entre "ancien kit" et "nouveau kit" sont totalement différentes et me font poser beaucoup de questions sur les travaux engagés depuis 3 mois.

Je vous remercie de l'aide que vous pourrez apporter.

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Answer

Merci beaucoup pour votre émail.
Je suis très désolée de ce problème que vous avez rencontré avec le standard du nouveau lot. Je peux vous assurer que nous prenons ceci très aux sérieux. Je suis en train d'investiguer ce problème et j'ai contacté le laboratoire pour plus d'information. Je vais vous recontacter dès que j'ai plus d'information. Je vous remercie pour votre patience.
Je suis désolée de cette inconvenance. N'hésitez pas à nous recontacter en attendant, si vous avez des questions.

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Answer

Thank you for your inquiry.

The kit use purified vWF from plasma as standard. The standard has some factor VIII, but not a significant amount.

Please note that when you receive this kit, the concentration of the standard will be on the vial itself. Our protocol online is generic that you will have to adapt to work out the volume of buffer needed for reconstitution.

I hope this information helps. Please contact us with any other questions.

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Please note: All products are "FOR RESEARCH USE ONLY AND ARE NOT INTENDED FOR DIAGNOSTIC OR THERAPEUTIC USE"

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