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  1. Link

    human-hnrnpa1-knockout-hek-293t-cell-line-ab266193.pdf

  1. Send me a copy of this email
    I agree to the terms and conditions.
Epigenetics and Nuclear Signaling DNA / RNA RNA Processing Other
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Human HNRNPA1 knockout HEK-293T cell line (ab266193)

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Western blot - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)
  • Sanger Sequencing - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)
  • Sanger Sequencing - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)
  • Cell Culture - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)

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一次抗体
Product image
Anti-MTCO2 antibody [12C4F12] (ab110258)
タンパク質
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Recombinant Human hnRNP A1 protein (ab123212)
一次抗体
Product image
Anti-hnRNP A1 antibody [EPR12768] (ab177152)

関連製品

製品の概要

  • 製品名

    Human HNRNPA1 knockout HEK-293T cell line
  • Parental Cell Line

    HEK293T
  • Organism

    Human
  • Mutation description

    Knockout achieved by using CRISPR/Cas9, 1 bp insertion in exon 1 and 4 bp insertion in exon 1
  • Passage number

    <20
  • Knockout validation

    Sanger Sequencing, Western Blot (WB)
  • アプリケーション

    適用あり: WB, Cell Culture, Sanger Sequencingmore details
  • Biosafety level

    2
  • 特記事項

    Recommended control: Human wild-type HEK293T cell line (ab255449). Please note a wild-type cell line is not automatically included with a knockout cell line order, if required please add recommended wild-type cell line at no additional cost using the code WILDTYPE-TMTK1.

    Cryopreservation cell medium: Cell Freezing Medium-DMSO Serum free media, contains 8.7% DMSO in MEM supplemented with methyl cellulose.

    Culture medium: DMEM (High Glucose) + 10% FBS

    Initial handling guidelines: Upon arrival, the vial should be stored in liquid nitrogen vapor phase and not at -80°C. Storage at -80°C may result in loss of viability.

    1. Thaw the vial in 37°C water bath for approximately 1-2 minutes.
    2. Transfer the cell suspension (0.8 mL) to a 15 mL/50 mL conical sterile polypropylene centrifuge tube containing 8.4 mL pre-warmed culture medium, wash vial with an additional 0.8 mL culture medium (total volume 10 mL) to collect remaining cells, and centrifuge at 201 x g (rcf) for 5 minutes at room temperature. 10 mL represents minimum recommended dilution. 20 mL represents maximum recommended dilution.
    3. Resuspend the cell pellet in 5 mL pre-warmed culture medium and count using a haemocytometer or alternative cell counting method. Based on cell count, seed cells in an appropriate cell culture flask at a density of 2x104 cells/cm2. Seeding density is given as a guide only and should be scaled to align with individual lab schedules.
    4. Incubate the culture at 37°C incubator with 5% CO2. Cultures should be monitored daily.

    Subculture guidelines:

    • All seeding densities should be based on cell counts gained by established methods.
    • A guide seeding density of 2x104 cells/cm2 is recommended.
    • A partial media change 24 hours prior to subculture may be helpful to encourage growth, if required.
    • Cells should be passaged when they have achieved 80-90% confluence.

    This product is subject to limited use licenses from The Broad Institute, ERS Genomics Limited and Sigma-Aldrich Co. LLC, and is developed with patented technology. For full details of the licenses and patents please refer to our limited use license and patent pages.

製品の特性

  • Number of cells

    1 x 106 cells/vial, 1 mL
  • Viability

    ~80%
  • Adherent /Suspension

    Adherent
  • Tissue

    Kidney
  • Cell type

    epithelial
  • STR Analysis

    Amelogenin X D5S818: 8, 9 D13S317: 12, 14 D7S820: 11 D16S539: 9, 13 vWA: 16, 19 TH01: 7, 9.3 TPOX: 11 CSF1PO: 11, 12
  • Antibiotic resistance

    Puromycin 1.00µg/ml
  • Mycoplasma free

    Yes
  • 保存方法

    Shipped on Dry Ice. Store in liquid nitrogen.
  • バッファー

    Constituents: 8.7% Dimethylsulfoxide, 2% Cellulose, methyl ether
  • 研究分野

    • Epigenetics and Nuclear Signaling
    • DNA / RNA
    • RNA Processing
    • Other
    • Neuroscience
    • Processes

ターゲット情報

  • 機能

    Involved in the packaging of pre-mRNA into hnRNP particles, transport of poly(A) mRNA from the nucleus to the cytoplasm and may modulate splice site selection. May play a role in HCV RNA replication.
  • 配列類似性

    Contains 2 RRM (RNA recognition motif) domains.
  • 翻訳後修飾

    Arg-194, Arg-206 and Arg-225 are dimethylated, probably to asymmetric dimethylarginine.
    Sumoylated.
  • 細胞内局在

    Nucleus. Cytoplasm. Localized in cytoplasmic mRNP granules containing untranslated mRNAs. Shuttles continuously between the nucleus and the cytoplasm along with mRNA. Component of ribonucleosomes. In the course of viral infection, colocalizes with HCV NS5B at speckles in the cytoplasm in a HCV-replication dependent manner.
  • Target information above from: UniProt accession P09651 The UniProt Consortium
    The Universal Protein Resource (UniProt) in 2010
    Nucleic Acids Res. 38:D142-D148 (2010) .

    Information by UniProt

関連製品

  • KO cell lysates

    • Human HNRNPA1 knockout HEK-293T cell lysate (ab256942)
  • KO cell pellets

    • Human HNRNPA1 knockout HEK-293T cell pellet (ab278886)
  • Related Products

    • Anti-hnRNP A1 antibody [EPR12768] (ab177152)
    • Anti-hnRNP A1 antibody [EPR12768] - BSA and Azide free (ab240196)

アプリケーション

The Abpromise guarantee

Abpromise保証は、 次のテスト済みアプリケーションにおけるab266193の使用に適用されます

アプリケーションノートには、推奨の開始希釈率がありますが、適切な希釈率につきましてはご検討ください。

アプリケーション Abreviews 特記事項
WB
Use at an assay dependent concentration. Predicted molecular weight: 38 kDa.
Cell Culture
Use at an assay dependent concentration.
Sanger Sequencing
Use at an assay dependent concentration.
特記事項
WB
Use at an assay dependent concentration. Predicted molecular weight: 38 kDa.
Cell Culture
Use at an assay dependent concentration.
Sanger Sequencing
Use at an assay dependent concentration.

画像

  • Western blot - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)
    Western blot - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)
    All lanes : Anti-hnRNP A1 antibody [EPR12768] (ab177152) at 1/1000 dilution

    Lane 1 : Wild-type HEK293T cell lysate
    Lane 2 : HNRNPA1 knockout HEK293T cell lysate
    Lane 3 : HeLa cell lysate

    Lysates/proteins at 20 µg per lane.

    Secondary
    All lanes : Goat anti-Rabbit IgG H&L (IRDye® 800CW) preadsorbed (ab216773) at 1/10000 dilution

    Predicted band size: 38 kDa
    Observed band size: 37 kDa why is the actual band size different from the predicted?



    Lanes 1-3: Merged signal (red and green). Green - ab177152 observed at 37 kDa. Red - loading control ab8245 observed at 36 kDa.

    ab177152 Anti-hnRNP A1 antibody [EPR12768] was shown to specifically react with hnRNP A1 in wild-type HEK293T cells. Loss of signal was observed when knockout cell line ab266193 (knockout cell lysate ab256942) was used. Wild-type and hnRNP A1 knockout samples were subjected to SDS-PAGE. ab177152 and Anti-GAPDH antibody [6C5] - Loading Control (ab8245) were incubated overnight at 4°C at 1 in 1000 dilution and 1 in 20000 dilution respectively. Blots were developed with Goat anti-Rabbit IgG H&L (IRDye® 800CW) preadsorbed (ab216773) and Goat anti-Mouse IgG H&L (IRDye® 680RD) preadsorbed (ab216776) secondary antibodies at 1 in 20000 dilution for 1 hour at room temperature before imaging.

     

     

  • Sanger Sequencing - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)
    Sanger Sequencing - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)

    Allele-1: 1 bp insertion in exon 1

     

  • Sanger Sequencing - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)
    Sanger Sequencing - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)

    Allele-2: 4 bp insertion in exon 1.

     

  • Cell Culture - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)
    Cell Culture - Human HNRNPA1 knockout HEK293T cell line (ab266193)

    Representative images of HNRNPA1 knockout HEK293T cells, low and high confluency examples (top left and right respectively) and wild-type HEK293T cells, low and high confluency (bottom left and right respectively) showing typical adherent, epithelial-like morphology. Images were captured at 10X magnification using a EVOS XL Core microscope.

     

     

プロトコール

  • Hemocytometer protocol
  • Mammalian cell tissue culture techniques protocol

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データシートおよび資料

  • SDS download

  • Datasheet download

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