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ローディング・コントロール・ガイド

ローディング・コントロール抗体とは-ウエスタン・ブロッティングの実験では必須です

ローディング・コントロール抗体(Loading control antibody)はウエスタン・ブロッティングにおいてポジティブ・コントロールとして使用する抗体で、次のことを目的としています。

  1. 電気泳動において各レーンのサンプルが均等に泳動されていることを確認する。
  2. ゲルからメンブレンにバンド(タンパク質)が確実に転写されていることを確認する。
  3. 異なるサンプル中に存在する特定のターゲット・タンパク質の量を補正・比較する。


ローディング・コントロール抗体を選択するに当たって大事な点が二つあります。

  1. その抗体のターゲット・タンパク質がサンプル中に必ず含まれていること。そのことから、細胞に一定量必ず含まれている(必ず発現している)、GAPDH や β-アクチン等のハウスキーピング・タンパク質に対する抗体がよく用いられます。
  2. ローディング・コントロールのバンドとターゲット・タンパク質のバンドが区別できる程度に離れている(両者の分子量がある程度異なっている)こと。


アブカムはローディング・コントロールとして適した抗体製品を多数ラインアップしています。サンプルの由来組織別、およびターゲット・タンパク質の分子量別に、適したローディング・コントロール抗体をまとめましたので、ご自身の実験に応じて製品をお選びください。

Why bother?-ローディング・コントロール抗体のススメ」を読む

ローディング・コントロール抗体ガイド

kDA

Whole cell

Mitochondrial

Nuclear

Membrane

Cytoskeleton

Serum

125

Vinculin






110




NaK ATPase



75






Transferrin

66



Lamin B1




60


HSP60





55



HDAC1





Alpha tubulin




Alpha tubulin


50

Beta tubulin




Beta tubulin





YY1





Actin




Actin


40

Beta actin




Beta actin


35

GAPDH


TBP











30


VDAC1/Porin

PCNA





Cyclophilin B






20

Cofilin

COX IV



Cofilin


15



Histone H3




なぜアブカムのローディング・コントロールを選ぶのか


様々なサンプルタイプおよび幅広い分子量に対応する、19 ものターゲットに対するローディング・コントロール抗体をラインアップしています。

アブカムのローディング・コントロール抗体には、ウサギ・モノクローナル抗体 RabMAb® 製品も多数あります。RabMAb® は優れた抗原認識能と高い親和性を有する抗体であり、抗体使用量が少なくて済む、バックグラウンドが低いなど、多くの特長があります。

また、大容量サイズや、HRP 標識済みのローディング・コントロール抗体もご用意しています。

ローディング・コントロール抗体一覧

RabMAb® ローディング・コントロール抗体

大容量サイズ・ローディング・コントロール抗体

HRP 標識済みローディング・コントロール抗体

ローディング・コントロール抗体セット

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